99久久精品国产9999高清-99久久精品国产高清一区二区-99久久精品国产免费-99久久精品国产免看国产一区-99久久精品国产片-99久久精品国产片久人

歡迎來到北京博奧森生物技術有限公司網站!
咨詢熱線

4009019800

當前位置:首頁  >  技術文章  >  熒光素標記作為標記需要符合哪些要求?

熒光素標記作為標記需要符合哪些要求?

更新時間:2023-06-09  |  點擊率:2227
  用于熒光素標記的抗體,要求是高特異性和高親和力的。所用抗血清中不應含有針對標本中正常組織的抗體。一般需經純化提取IgG后再作標記。作為標記的熒光素應符合以下要求:
  ①應具有能與蛋白質分子形成共價鍵的化學基團,與蛋白質結合后不易解離,而未結合的色素及其降解產物易于清除。
  ②熒光效率高,與蛋白質結合后,仍能保持較高的熒光效率。
  ③熒光色澤與背景組織的色澤對比鮮明。
  ④與蛋白質結合后不影響蛋白質原有的生化與免疫性質。
  ⑤標記方法簡單、安全無毒。
  ⑥與蛋白質的結合物穩定,易于保存。
  常用熒光素標記蛋白質的方法有攪拌法和透析法兩種。以FITC(異硫氰酸熒光素)標記為例,攪拌標記法為:先將待標記的蛋白質溶液用0.5ml/L pH9.0的碳酸鹽緩沖液平衡,隨后在磁力攪拌下逐滴加入FITC溶液,在室溫持續攪拌4~6h后,離心,上清即為標記物。此法適用于標記體積較大,蛋白含量較高的抗體溶液。優點是標記時間短,熒光素用量少。但本法的影響因素多,若操作不當會引起較強的非特異性熒光染色。
  透析法適用于標記樣品量少,蛋白含量低的抗體溶液。此法標記比較均勻,非特異染色也較低。方法為:先將待標記的蛋白質溶液裝入透析袋中,置于含FITC (異硫氰酸熒光素)的0.01mol/L pH9.4碳酸鹽緩沖液中反應過夜,以后再對PBS透析法去除游離色素。低速離心,取上清。
  熒光素標記完成后,還應對標記抗體進一步純化以去除未結合的游離熒光素和過多結合熒光素的抗體。純化方法可采用透析法或層析分離法。
中国精品18videosex性中国 | 少妇太爽了在线观看免费视频 | 在线永久免费观看黄网站 | 一区一区三区产品乱码 | 漂亮人妻被黑人久久精品 | 亚洲国产成人一区二区精品区 | 2022国产精品福利在线观看 | 国产大片91精品免费观看不卡 | 国产精品沙发午睡系列 | 91久久线看在观草草青青 | 国产精品综合色区在线观看 | 在线天堂最新版资源 | 国产黄a三级三级三级av在线看 | 国产精品青青青高清在线观看 | 胯下粗长挺进人妻体内电影 | 国产成人精品视频免费 | 国产精品自在线拍国产 | 国产美女流白浆的免费视 | 国产亚av手机在线观看 | 97国产在线视频公开免费 | 欧美成人一区二区三区 | 亚洲国产精品无码久久久秋霞1 | 无码人妻精品一区二区三区蜜桃 | 亚洲人成影院在线观看 | 好吊妞无缓冲视频观看 | 国产精品亚洲精品日韩已方 | 又湿又紧又大又爽a视频 | 精品人妻无码一区二区三区蜜桃一 | 亚洲国产成人久久一区www | 久久久久久99av无码免费网站 | 成人国产三级精品 | 男人激烈吮乳吃奶视频免费 | 色欲色欲天天天www亚洲伊 | 亚洲第一天堂无码专区 | 无码人妻精品一区二区三区9厂 | 国产免费一区二区 | 一本色道久久综合无码人妻 | 日韩人妻无码精品-专区 | 国产末成年女av片 | 国产av无码专区亚洲av毛网站 | 国产精品99久久久久久猫咪 |